試劑盒簡介

1、產(chǎn)品名稱

結(jié)核分枝桿菌T細(xì)胞免疫反應(yīng)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫斑點法)

2、預(yù)期用途

結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌感染引起的一種慢性傳染性疾病，主要通過呼吸道傳播，可累及全身各個器官，引發(fā)活動性結(jié)核病或潛伏感染結(jié)核病。結(jié)核感染主要引起細(xì)胞免疫，作為免疫應(yīng)答的一部分，外周血中的T細(xì)胞在受到結(jié)核特異性抗原刺激后轉(zhuǎn)化為活化的效應(yīng)T細(xì)胞，分泌γ-干擾素（Interferon-γ，簡稱IFN-γ）。用酶聯(lián)免疫斑點法（Enzyme-linked ImmunoSpot Assay，簡稱ELISPOT）檢測分泌IFN-γ的細(xì)胞，通過對微孔膜上的斑點記數(shù)可以推測體內(nèi)是否存在對結(jié)核桿菌反應(yīng)的效應(yīng)T細(xì)胞從而對結(jié)核桿菌的感染進(jìn)行輔助診斷。

本試劑盒選用致病性結(jié)核分枝桿菌特有的，而卡介苗、其它分枝桿菌沒有的缺失區(qū)域1（RD1）中兩種基因工程抗原ESAT6和CFP10同時進(jìn)行檢測，提高了反應(yīng)的特異性和靈敏度。采用的ELISPOT法是從單細(xì)胞水平上進(jìn)行檢測，能夠及時捕獲細(xì)胞周圍分泌的細(xì)胞因子，靈敏度非常高，遠(yuǎn)超過傳統(tǒng)的ELISA法。

本試劑盒適用于結(jié)核病的輔助診斷，其結(jié)果不能代替痰涂片、培養(yǎng)或影像學(xué)等其它較為經(jīng)典的結(jié)核分枝桿菌感染的診斷方法，亦不作為臨床診斷的唯一證據(jù)。

3、注意事項

（1）采血管必須用BD公司的肝素鋰采血管；

（2）第一天實驗操作均須在無菌條件下進(jìn)行；

（3）配制細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)溶液時必須準(zhǔn)確計數(shù)，細(xì)胞濃度要求每100μL含25萬個細(xì)胞的標(biāo)準(zhǔn)溶液；

（4）注意換槍頭，避免加樣引起的交叉污染；

（5）第二天實驗操作無需在無菌條件下進(jìn)行；

（6）每個步驟前的洗滌要徹底，加樣前務(wù)必將板子拍干；

（7）務(wù)必按說明書比例配制抗體工作液和酶工作液；

（8）讀取結(jié)果前務(wù)必將板子晾干。